Transformatie van E. coli met GFP

Dit leuke experiment van Edvotek (kit #223) stelt leerlingen in staat om genetisch gemodificeerde micro-organismen te maken door E. coli te transformeren met het gen voor groen fluorescerend eiwit (pFluoroGreen) van de kwal Aequorea victoria. De getransformeerde bacteriecellen worden groen in normaal licht en vertonen een duidelijke fluorescentie onder UV-licht. De transformatie wordt geverifieerd door selectie op LB-agar met ampicilline.

De kit is geschikt voor het onderwijs op middelbare scholen en is voldoende voor 10 groepen leerlingen.

De totale duur van het experiment is ongeveer 65 minuten verspreid over twee dagen: uitplaten duurt ongeveer 50 minuten, gevolgd door incubatie gedurende de nacht en scoren in ongeveer 15 minuten.

De kit wordt geleverd met alle benodigde reagentia en monstermaterialen. De volgende apparatuur moet beschikbaar zijn om het experiment uit te voeren (apart aangeschaft): incubator op 37°C, twee waterbaden, micropipetten met tips, thermometer, ijs voor ijsbad, markeerpen, magnetron (of als alternatief bunsenbrander of kookplaat), hittebeschermende handschoenen en UV-lamp met lange golflengte.

Als u wilt werken met spectrofotometrische bepalingen, worden de volgende gegevens verstrekt door Edvotek: Excitatiepiek: 473 nm Emissiepiek: 509 nm

Download de bijgewerkte Engelse handleiding op de website van Edvotek. De link staat in de doos die bij de kit wordt geleverd.

Toepassing van het product

In vakken als biologie en biotechnologie kunnen studenten met dit experiment experimenteel aan de slag met gentransformatie en genexpressie en het ondersteunt thema's als gentechnologie, antibioticaresistentie en regulatie van eiwitsynthese. Door fluorescentie als indicator te gebruiken, krijgen leerlingen directe visuele feedback over het succes van de transformatie, waardoor hun begrip van moleculaire processen in de praktijk wordt versterkt.

Soortgelijke technieken worden gebruikt in onderzoekslaboratoria en in de biotechnologie en medische beroepen - bijvoorbeeld bij de productie van recombinante eiwitten, de ontwikkeling van fluorescente markers in de celbiologie of bij het bouwen van biosensoren voor diagnostiek.

Let op: voor het educatieve gebruik van deze kit gelden specifieke wettelijke vereistenin Nederland.

Specificaties

Merk: Edvotek