Transformatie van E.coli met pGAL (blauwe kolonies)

Edvotek kit nr. 221.

Dit experiment werkt met plasmide getransformeerde bacteriën. Invoeging van het Lac+ fenotype in de getransformeerde bacteriën kan direct worden waargenomen doordat de bacteriën blauwe kolonies vormen wanneer ze worden gekweekt op ampicillinehoudende agar.

Bacteriën met het geïnvoegde en werkende plasmide DNA groeien als blauwe kolonies op de agar. Deze getransformeerde bacteriën kunnen alleen groeien in aanwezigheid van antibiotica in de agar en als het plasmide DNA op de juiste manier in de bacterie is ingebracht. Bekijk de procedure in de afbeeldingenreeks.

 

Specificaties:

Materialen voor 10 groepen

Proefduur 45 min + 5 min. Overnachten incuberen

 

Eisen aan de apparatuur buiten de inhoud van de kit:

Incubator

2 waterbaden

Warmteplaat/microgolf

Micropipetten (5-50 µl)

Pipetaspirator

Markeerpen

Warmtebestendige handschoenen

Gebeschermde bril

Latex handschoenen

Ice voor ijsbad

Bevoorrading met alle benodigde monstermaterialen naast bovenstaande apparatuur. De transformatiecellen zijn gevriesdroogd, dus de kit is na ontvangst ongeveer 9 maanden houdbaar.

Download de Engelse handleiding via de link op het infoblad dat bij de kit wordt geleverd.

Als u wilt werken met spectrofotometrische bepaling, worden de volgende gegevens verstrekt door Edvotek: Excitatiepiek: 473 nm Emissiepiek: 509 nm